واریانت های bcr-abl در بیماران لوسمی میلوئیدی مزمن به روش rt-multiplex pcr

هدف: لوسمی (سرطان خون) میلوئیدی مزمن یک بیماری کلونال بدخیم سلول های پایه خون ساز است که نتیجه آن افزایش سلول های میلوئیدی، اریتروئیدی و پلاکت ها در خون محیطی و هیپرپلازی در مغز استخوان است. تحقیقات انجام شده واریانت های متفاوتی از bcr-abl را در بیماران لوسمی میلوئیدی مزمن نشان داده است. تاکنون در ایران صرفاً 3 واریانت در برخی از آزمایشگاه های تشخیص طبی شناسایی می شود که یکی از دلایل آن عدم طراحی و استفاده از آغازگرهایی است که به طور همزمان بتواند کلیه واریانت ها را شناسایی کند. در این مطالعه با روش rt-multiplex pcr کلیه واریانت ها در بیماران لوسمی میلوئیدی مزمن شناسایی شد. مواد و روش ها: نمونه خون از یکصد فرد تحت درمان یا در مرحله تشخیص بیماری دریافت و سپس با استفاده از کیت تجارتی roche از 600 میکرولیتر کلیه نمونه ها rna استخراج شد. rna استخراج شده توسط آنزیم نسخه برداری معکوس به cdna تبدیل و با استفاده از 2 جفت آغازگر نمونه ها برای واریانت های bcr-abl مورد آزمایش قرار گرفتند. به موازات کلیه نمونه ها به روش rt-multiplex nested pcr روی ژل آگارز بررسی شد. نتایج: rt-multiplex pcr توانست bcr-abl را در تمام نمـونه هایی که برای این mrna ژن ادغامی مثبـت بوده اند نشـان دهـد. در یکـصـد نـمونـه جـمـع آوری شــده به روشrt-multiplex pcr ، 46 درصـد مثبـت و 54 درصـد مـنفـی و به روش rt-multiplex nested pcr، 44 درصد مثبت و 56 درصد منفی بوده است. نتیجه گیری: ما در این تحقیق با استفاده از یک pcr یک مرحله ای توانستیم واریانت های بیشتری از bcr- abl را در یک لوله در زمان کوتاه تر و هزینه کمتر شناسایی کنیم، ضمن مقایسه معلوم شد این روش از اختصاصیت 100 درصد برخوردار است. این پژوهش می تواند با استفاده از تعداد نمونه های بیشتر برای تشخیص سایر واریانت ها و روشreal time pcr برای بررسی کمی نمونه ها کامل تر شود.